Clone Smaster的特點(diǎn):
1、一站式,用戶只需要準(zhǔn)備PCR產(chǎn)物即可進(jìn)行AT克隆。
2、T載體由XcmI酶切方法制備,兩個5"端含T突出,自連率幾乎為零。
3、克隆效率高,一次AT克隆實(shí)驗(yàn)一般能得到上百個重組子。
4、陽性率高,一般能到90%以上,大大縮短了篩選工作。
5、提供供兩次實(shí)驗(yàn)用的對照插入片段,方便分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。
6、插入位點(diǎn)兩側(cè)有對稱的常見酶切位點(diǎn),便于對克隆的PCR片段進(jìn)行近一步的分析。
7、克隆位點(diǎn)兩側(cè)分別有T7和SP6RNA聚合酶啟動子,便于用克隆的PCR片段制備RNA探針。
8、可以使用pUC/M13Forward和Reverse測序引物測定插入片段的序列。
9、T克隆位點(diǎn)位于β-半乳糖苷酶的α-肽編碼區(qū)內(nèi),可以進(jìn)行藍(lán)白斑篩選。
10、含有絲狀噬菌體f1復(fù)制起始子,可以制備單鏈DNA。
Clone Smaster的優(yōu)勢:
1、直接將DNA克隆到環(huán)狀載體;
2、試劑成本低;
3、線性PCR產(chǎn)物和環(huán)狀質(zhì)粒上的DNA(單個,或多個,或混合)均可直接克隆到目標(biāo)載體;
4、該方法既可用于通用重疊序列(接頭)的標(biāo)準(zhǔn)化克隆,也可用于特需要求的去除接頭序列的無縫克??;
5、配套載體改造試劑盒,讓自己的載體可一鍵改造為Nimble通用載體。